华西口腔医学杂志

作者：张丽, 彭世元, 唐飞扬, 蹇静薇, 袁硕声, 徐晓梅

单位：1.西南医科大学附属口腔医院正畸科，泸州 646000；2.西南医科大学口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室，泸州 646000

关键词：牙周膜干细胞,叉头转录因子1/β-连环蛋白信号通路,氧化应激,柚皮素,成骨分化

基金：四川省科技计划项目(2023ZYD0112);大学生创新创业项目(2023463);泸州市科技计划项目(2024LZXNYDJ041)

目的 探究柚皮素（NAR）对氧化应激状态下人牙周膜干细胞（hPDLSCs）成骨潜能的保护作用及其相关机制。 方法 用过氧化氢（H2O2）建立hPDLSCs氧化损伤模型，然后加入不同浓度的NAR及0.5 μmol/L的叉头转录因子1（FOXO1）抑制剂AS1842856对其进行干预。利用细胞计数试剂盒法（CCK8）筛选出H2O2及NAR的最适作用浓度。通过碱性磷酸酶（ALP）染色和实时荧光定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测各组hPDLSCs中ALP、Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）的表达情况，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和活性氧荧光探针（DCFH-DA）染色检测各组hPDLSCs中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）以及乳酸脱氢酶（LDH）的表达情况。同时，使用qRT-PCR和蛋白印迹法（Western blot）分别检测各组FOXO1和β-连环蛋白（β-catenin）的基因与蛋白表达水平。 结果 H2O2暴露导致hPDLSCs氧化损伤增加，细胞内ROS水平上升，MDA、LDH表达升高（P<0.05）；成骨分化降低，ALP染色变浅和成骨分化相关基因ALP、RUNX2、OCN的信使核糖核酸（mRNA）表达水平降低（P<0.05）。NAR共处理可缓解H2O2所致的hPDLSCs氧化损伤并提升其抗氧化能力、恢复其成骨能力。FOXO1抑制剂AS1842856可下调β-catenin的表达（P<0.05），明显减弱NAR的抗氧化作用及恢复成骨的能力（P<0.05）。 结论 NAR可以通过激活hPDLSCs内的FOXO1/β-catenin信号通路从而提升hPDLSCs的抗氧化能力，减轻氧化应激损伤及其所致的成骨能力丧失。

来源：2025年第4期

《华西口腔医学》期刊编辑部

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