华西口腔医学杂志

作者：张雪颖, 孟鑫, 刘志臻, 张康, 冀洪海, 孙敏敏

单位：1.山东第二医科大学口腔医学院，潍坊 261053；2.山东第二医科大学附属医院口腔科，潍坊 261000

关键词：人参皂苷Rb3,磷酸化细胞外信号调节激酶,成骨分化,牙周炎,牙槽骨吸收

基金：山东省自然科学基金青年项目(ZR2022QH273)

目的 探究人参皂苷Rb3（Rb3）在牙周炎症环境中对成骨的促进作用，并阐述其机制。 方法 组织块法培养人牙周膜干细胞（hPDLSCs），通过流式细胞术进行细胞干性鉴定。细胞计数试剂盒（CCK-8）、钙黄绿素乙酰氧基甲酯（Calcein-AM）与碘化丙啶（PI）检测Rb3对hPDLSCs活力的影响。体外细胞实验分组：对照组、10 μg/mL 脂多糖（LPS）组、10 μg/mL LPS+100 μmol/L Rb3组和10 μg/mL LPS+200 μmol/L Rb3组。碱性磷酸酶（ALP）染色检测成骨诱导后各组hPDLSCs的ALP活性。定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测成骨诱导后各组hPDLSCs中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、runt相关转录因子2（RUNX2）、转化生长因子-β（TGF-β）基因的表达情况。蛋白质免疫印迹（Western blot）检测各组hPDLSCs内磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）相关蛋白表达情况。Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、结扎组、结扎+Rb3组。对左侧磨牙-上颌骨组织行显微计算机断层扫描（micro-CT）检测；检测完成后，将左侧磨牙-上颌骨制作牙周组织切片。苏木精-伊红（HE）染色检测炎细胞浸润、附着丧失情况。马松（Masson）染色检测牙龈胶原纤维的破坏情况。免疫荧光染色检测RUNX2蛋白、p-ERK蛋白表达情况。qRT-PCR法检测大鼠牙龈组织中TGF-β的表达情况。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠外周血清IL-6蛋白表达情况。大鼠心脏血行流式细胞术，检测Treg细胞占比。采用GraphPad Prism 10.1.2软件对实验数据进行统计学分析。 结果 Rb3对hPDLSCs活性无影响。hPDLSCs成骨诱导后的qRT-PCR与ALP染色结果显示Rb3可抑制炎症性hPDLSCs内IL-6、IL-8基因表达，促进TGF-β基因表达，同时促进炎症性hPDLSCs成骨分化。Western blot结果显示Rb3抑制炎症性hPDLSCs p-ERK蛋白表达。micro-CT、Masson染色、HE染色结果显示Rb3可促进牙周炎大鼠牙槽骨的形成，同时抑制牙周纤维组织破坏、附着丧失及炎症细胞浸润。流式细胞术结果显示Rb3可促进牙周炎大鼠外周血Treg细胞分化。ELISA与qRT-PCR结果显示Rb3可抑制牙周炎大鼠IL-6蛋白表达，促进TGF-β基因表达。免疫荧光结果显示Rb3可促进牙周炎大鼠RUNX2蛋白表达，抑制p-ERK蛋白表达。 结论 Rb3可能通过调控p-ERK通路减轻牙周炎大鼠牙周组织炎症反应，并促进hPDLSCs成骨分化。

来源：2025年第2期

《华西口腔医学》期刊编辑部

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