华西口腔医学杂志

作者：于汶源, 赵鹏, 邵禹, 徐勇, 徐进, 谢磊, 于承浩, 何秋萍, 陈正岗

单位：1.山东第二医科大学口腔医学院，潍坊 261053；2.康复大学青岛医院（青岛市市立医院）口腔科，青岛 266071；3.滨州医学院口腔医学院，烟台 264000；4.青岛大学青岛医学院，青岛 266073；5.滨州医学院附属烟台口腔医院，烟台 264000

关键词：唾液腺腺样囊性癌,Ras同源物家族成员C,Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1,上皮-间充质转化,miR-138-5p

基金：山东省医药卫生科技项目(202308020420)

目的 探讨沉默Ras同源物家族成员C（RhoC）对唾液腺腺样囊性癌（SACC）增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化（EMT）的影响及其分子机制。 方法 选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织各27例，通过蛋白免疫印迹（Western blot）和免疫组织化学法检测RhoC的表达水平。针对RhoC基因序列设计3条小干扰RNA（siRNA），转染至SACC-LM和SACC-83细胞系中并评估转染效率。通过Western blot比较RhoC、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1（ROCK1）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）、扭曲家族bHLH转录因子1（TWIST1）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的蛋白表达水平。CCK-8实验、流式细胞术、Transwell侵袭实验、伤口愈合实验分别检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的差异。生物信息学方法预测RhoC可能的上游微小RNA（miRNA）及其在SACC中的表达情况，双荧光素酶报告基因实验验证二者的结合位点。 结果 RhoC在SACC中的表达显著上升（P<0.05）。沉默RhoC后，实验组ROCK1、p-p38MAPK、TWIST1、N-cadherin、Vimentin的表达显著下降，E-cadherin的表达显著上升（P<0.05）；p38MAPK的表达无明显差异（P>0.05）；细胞增殖、侵袭和迁移能力显著下降，凋亡率显著上升（P<0.05）。miR-138-5p在SACC中低表达，miR-138-5p micmic可以显著下调转染RhoC野生型质粒后293T细胞的荧光素酶活性（P<0.05）。 结论 RhoC在SACC中高表达，沉默RhoC可能靶向下游ROCK1/p38MAPK/TWIST1信号通路从而抑制SACC的增殖、侵袭、迁移和EMT，同时促进其凋亡。miR-138-5p在SACC中低表达，是RhoC潜在的上游基因，二者可能存在结合位点。

来源：2024年第6期

《华西口腔医学》期刊编辑部

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