华西口腔医学杂志

作者：唐小雪, 周政, 李启期, 姜丹丹

单位：石河子大学第一附属医院口腔科，石河子 832008

关键词：西格列汀,脂多糖,人牙周膜干细胞,成骨分化,基质细胞衍生因子-1,CXC趋化因子受体4

基金：石河子大学自主资助支持校级科研立项项目(ZZZC20-1957A)

目的 探讨西格列汀对脂多糖（LPS）诱导的炎症微环境下人牙周膜干细胞（hPDLSCs）增殖、凋亡、炎症和成骨分化的影响及分子机制。 方法 体外培养hPDLSCs，用不同浓度的西格列汀处理后检测细胞活力，以确定后续西格列汀实验浓度。采用1 µg/mL LPS刺激诱导24 h建立hPDLSCs炎症模型并分为空白组、对照组、西格列汀低浓度组（0.5 µmol/L）、西格列汀中浓度组（1 µmol/L）、西格列汀高浓度组（2 µmol/L）、西格列汀高浓度+基质细胞衍生因子-1（SDF-1）/CXC趋化因子受体4（CXCR4）通路抑制剂（AMD3100）组（2 µmol/L+10 µg/mL）。细胞计数试剂盒-8检测培养24、48、72 h后的hPDLSCs增殖活性；流式细胞术检测培养72 h后hPDLSCs凋亡情况；诱导成骨分化21 d后茜素红染色检测hPDLSCs成骨分化能力，试剂盒测定hPDLSCs中碱性磷酸酶（ALP）活性；酶联免疫吸附检测hPDLSCs培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-6水平；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测hPDLSCs中成骨分化相关基因Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）、骨桥蛋白（OPN）及SDF-1和CXCR4 mRNA表达；Western blot检测hPDLSCs中SDF-1、CXCR4蛋白表达。 结果 与空白组比较，对照组hPDLSCs增殖活性、矿化结节数量、染色强度、ALP活性和RUNX2、OCN、OPN mRNA及SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白表达水平显著降低，凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高（P<0.05）；与对照组比较，西格列汀低、中、高浓度组hPDLSCs增殖活性、矿化结节数量、染色强度、ALP活性和RUNX2、OCN、OPN mRNA及SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白表达水平依次升高，凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平依次降低（P<0.05）；AMD3100可部分逆转高浓度西格列汀对LPS诱导的hPDLSCs的作用效果（P<0.05）。 结论 西格列汀可能通过激活SDF-1/CXCR4信号通路促进LPS诱导的炎症微环境下hPDLSCs的增殖和成骨分化，抑制hPDLSCs凋亡和炎症反应。

来源：2024年第1期

《华西口腔医学》期刊编辑部

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