华西口腔医学杂志

作者：李文健, 童磊, 王奇民, 韩红钰, 陈正岗

单位：1.青岛大学附属青岛市市立医院口腔医学中心，青岛 266071；2.大连医科大学口腔医学院，大连 116044

关键词：法尼基转移酶,HRAS,涎腺腺样囊性癌,迁移,侵袭

基金：国家自然科学基金(81372908)

目的　通过体外实验探讨法尼基转移酶（FTase）对涎腺腺样囊性癌SACC-LM和SACC-83细胞迁移侵袭及上皮间充质转化（EMT）的作用及其机制。方法　针对人FTase基因序列设计构建3条小干扰RNA（si-RNA），采用处于对数生长期的SACC-LM及SACC-83细胞，经脂质体瞬时转染技术抑制细胞FTase表达，分别命名为FTase-siRNA-1组、FTase-siRNA-2组、FTase-siRNA-3组，同时设置阴性对照组（NC-siRNA），空白对照组（仅加入转染试剂）。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测FTase、HRAS的mRNA表达，选择沉默效率最高的FTase-siRNA进行后续实验；蛋白质免疫印迹法检测FTase、HRAS、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT、p65、磷酸化p65（Ser563）、上皮钙依赖黏附蛋白、波形蛋白、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的蛋白表达以及HRAS膜蛋白表达；Transwell小室及细胞划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力。结果　与空白对照组及阴性对照组相比，FTase-siRNA-1组mRNA及蛋白相对表达量均降低（P<0.05），HRAS mRNA和总蛋白表达的差异无统计学意义（P>0.05），HRAS膜蛋白相对表达量降低（P<0.05），上皮钙依赖黏附蛋白相对表达量升高（P<0.05），波形蛋白相对表达量降低（P<0.05），MMP-9蛋白相对表达量降低（P<0.05），RAS/PI3K/AKT/核因子-κB信号通路相关蛋白AKT、p65相对表达量的差异无统计学意义（P>0.05），但磷酸化AKT、磷酸化p65蛋白相对表达量降低；与空白及阴性对照组相比，FTase-siRNA-1组细胞侵袭及迁移能力显著下降（P<0.05）。结论　体外沉默FTase可有效抑制人涎腺腺样囊性癌细胞SACC-LM和SACC-83的侵袭、迁移能力，其作用可能是通过干扰HRAS膜蛋白的定位，调控RAS/PI3K/AKT/核因子-κB信号通路，介导EMT而实现。

来源：2022年第4期

《华西口腔医学》期刊编辑部

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